1.準確稱量試劑:根據(jù)培養(yǎng)基的配方要求,準確稱量所需的各種化學(xué)藥品。確保所用化學(xué)試劑的純度,因為不純的試劑可能影響細胞的生長。
2.校正pH值:將稱量好的試劑放入容器內(nèi),加入適量的蒸餾水后加熱溶解,并不斷攪拌以確?;旌暇鶆?。使用pH試紙或酸度計測定酸堿度,并根據(jù)需要用1N NaOH或1N HCl調(diào)節(jié)至適宜的pH值范圍(一般為7.2~7.6)。
3.過濾:將調(diào)整好pH值的培養(yǎng)基通過過濾器過濾,以去除雜質(zhì)和微生物。過濾時可使用紗布夾棉花或濾紙進行初步過濾,隨后可能需要使用更精細的過濾設(shè)備以確保無菌。
4.ScienCell培養(yǎng)基分裝:將過濾后的培養(yǎng)基分裝到試管或三角瓶中,通常使用無菌操作技術(shù)來避免污染。分裝后的培養(yǎng)基需要進行高壓蒸汽滅菌,以確保無菌。滅菌條件一般是15磅/平方英寸的壓力下,溫度達到121.3℃,持續(xù)20~30分鐘。
5.保存:滅菌后的培養(yǎng)基應(yīng)存放在4℃低溫環(huán)境中,避免陽光直射和凍結(jié),以保證其穩(wěn)定性和有效性。打開后的培養(yǎng)基建議在一個月內(nèi)使用完畢,以保證細胞培養(yǎng)的效果。
綜上所述,ScienCell培養(yǎng)基的制備是一個涉及多個精確步驟的過程,從準確稱量試劑到最終的儲存和使用,每一步都需要嚴格控制條件以確保培養(yǎng)基的質(zhì)量和效果。